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黑色素瘤相關(guān)抗原C3抗體免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟

發(fā)表時(shí)間:2023-06-28
黑色素瘤相關(guān)抗原C3抗體免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟:

一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:

磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。

二、實(shí)驗(yàn)步驟

1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。

2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。

3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地?fù)u晃振蕩。

4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。

5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。

核酸電泳液:50×TAE電泳液(250 mL)
堿性膠電泳液
天恩澤超級電泳液
天恩澤超級電泳液(含染料)(見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品)
核酸上樣液
DNA非變性PAGE上樣液(1.5 mL)
DNA非變性PAGE上樣液(10 mL)
DNA堿性膠上樣液(1.5 mL)
DNA堿性膠上樣液(10 mL)
DNA尿素-PAGE上樣液(1.5 mL)
DNA尿素-PAGE上樣液(10 mL)
DNA上樣液(紅),6×(非甘油)(見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品)
DNA上樣液(藍(lán)),6×(非甘油)(見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品)
DNA上樣液,6×(紅)
DNA上樣液,6×(藍(lán))
miRNA尿素-PAGE上樣液(1.5 mL)
miRNA尿素-PAGE上樣液(10 mL)
三合一RNA上樣液(A型)
三合一RNA上樣液(B型)
核酸染料
SYBR Green Ⅱ核酸染料



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