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使用方法：
收到細(xì)胞人細(xì)胞直銷后，請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 人細(xì)胞直銷
簡稱：GEO

種屬：人

來源：

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：貼壁

產(chǎn)品規(guī)格：1×106

單位：T25/瓶

貨號：AE0457

基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細(xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3-(Hydroxymethyl)cyclopentanol  中文名：  分子式：C6H12O2    乙酰膽堿酯酶（AchE）試劑盒   可見分光光度法   50管/48樣

3-(Hydroxymethyl)-3-nitro-1-(4-octylphenyl)-1,4-butanediol  中文名：  分子式：C19H31NO5    組織及血液酸性0酸酶（ACP）試劑盒   可見分光光度法   50管/24樣

3-(Bromomethyl)-2-cyclopropyl-4-(4'-fluorophenyl)quinoline  中文名：  分子式：C19H15BrFN    組織及血液堿性0酸酶（AKP/ALP）試劑盒   可見分光光度法   50管/24樣           

3-(Boc-Amino)piperidine  中文名：  分子式：C10H20N2O2    血清鐵   英文名稱：   Human serum Lron   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   Lron

3-(5-(2-Aminopropyl)-7-cyanoindolin-1-yl)propyl benzoate (2R,3R)-2,3-dihydroxysuccinate  中文名：  分子式：C26H31N3O8    可溶性ENG/sCD105   英文名稱：   Human soluble Endoglin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   ENG/sCD105
小鼠抑制素A(mouse Inhibin A)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝     Catalpalactone  中文名：  分子式：C15H14O4 

小鼠抑制素A(INH-A)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  N6-Benzyladenine  中文名：N6-芐基腺嘌呤  分子式：C12H11N5 

小鼠抑制素A   英文名稱：   Insulin A   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   Inhibin A  N6-Benzoyl-5'-O-(4,4'-dimethoxytrityl)-2'-deoxyadenosine  中文名：N6-苯甲?；?/span>-5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基)-2'-脫氧腺苷  分子式：C38H35N5O6  度：98.0%

小鼠抑瘤素mouse  M(mouse OSM)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝     Benserazide   中文名：鹽酸芐絲肼  分子式：C10H16ClN3O5 

小鼠抑瘤素Melisa試劑盒   小鼠抑瘤素M試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠抑瘤素M試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠抑瘤素M試劑盒、小鼠抑瘤素Melisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  N-Acetyl-5-hydroxytryptamine  1210-83-9  中文名：N-乙?；?/span>-5-羥基色胺  分子式：C12H14N2O2  度：99.0%  關(guān)鍵詞：
Amitriptyline   549-18-8  中文名：鹽酸阿米替林  分子式：C20H24ClN    0酸化SMAD2/3抗體   英文名稱：   Human Phosphor Mothers Against Decapeaplegic Homolog 2/3 aibody   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   PSMAD2/3 Ab

2-Aminophenyl phenyl sulfone  4273-98-7  中文名：2-氨基二苯砜  分子式：C12H11NO2S    0酸化核因子κB   英文名稱：   Human phosphor-Nuclear Factor kappa B   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   pNFκB

8-Amino-2-naphthalenesulfonic acid  119-28-8  中文名：8-氨基-2-萘磺酸  分子式：C10H9NO3S    羧酸酯酶（CarE）測試盒   可見分光光度法   50管/48樣

2-Amino-5-mercapto-1,3,4-thiadiazole  2349-67-9  中文名：2-氨基-5-巰基-1,3,4-噻二唑  分子式：C2H3N3S2    線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅱ活性測試盒   可見分光光度法   25管/24樣

2-Amino-5-nitrobenzophenone  1775-95-7  中文名：2-氨基-5-硝基二苯甲酮  分子式：C13H10N2O3    線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅲ活性測試盒   可見分光光度法   25管/24樣
人細(xì)胞直銷人脂蛋白脂酶elisa試劑盒   人脂蛋白脂酶試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人脂蛋白脂酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人脂蛋白脂酶試劑盒、人脂蛋白脂酶elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  2-Benzyl-2-(dimethylamino)-4'-morpholinobutyrophenone  中文名：2-芐基-2-(二甲基氨基)-4'-嗎啉基苯基丁酮  分子式：C23H30N2O2  度：98.0%

人脂蛋白脂酶(LPL)酶聯(lián)吸附測定試劑盒   Human LPL (Lipoprotein Lipase) ELISA Kit  2-Aminophenyl phenyl sulfone  中文名：2-氨基二苯砜  分子式：C12H11NO2S  度：98.0%

人脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           2-Benzylsuccinic acid  中文名：  分子式：C11H12O4 

人脂蛋白脂酶(LPL)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  2-Benzyl-2-(dimethylamino)-4'-morpholinobutyrophenone  119313-12-1  中文名：2-芐基-2-(二甲基氨基)-4'-嗎啉基苯基丁酮  分子式：C23H30N2O2  度：98.0%   

人脂蛋白關(guān)聯(lián)0脂酶A2(LpPLA2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒   Human LpPLA2 (Phospholipase A2, Lipoprotein Associated) ELISA Kit  2-Aminothiazol-4-acetic acid  29676-71-9  中文名：2-氨基噻唑-4-乙酸  分子式：C5H6N2O2S

實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。