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PCR實驗方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：

實驗步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達(dá)量。

特點優(yōu)勢：
1. 特異性：即雞包涵體肝炎病毒病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

IL24 Protein Human 重組人 IL-24 / MDA-7 蛋白 (His 標(biāo)簽)β-，英文名或英文縮寫：2-pxenylethanol，級別：AR，99%，規(guī)格：1克

Sp2/0-Ag14(小鼠細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 C6(腦細(xì)胞)鋇 BcriuM;

T-110B透明質(zhì)酸酶(含100mL酶解緩沖液)10mL乙酸辛酯，英文名或英文縮寫：Octyl acetate，級別：AR，98%，規(guī)格：25克

CD200 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD200 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 氧化銪shēng huà shì jì容量：RT25克

口腔角質(zhì)細(xì)胞生長添加物OKGS(細(xì)胞分離液)
PTPN12 Others Human 人 PTPN12 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 頭孢硫脒；先鋒霉素18號Cefathiamidine質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR

腎動脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)D-絲氨酸H-D-Ser-OH質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

散鱗鏡鯉尾鰭細(xì)胞;YZ21 人成纖維細(xì)胞，Hs 578Bst細(xì)胞 HO-8910PM(高轉(zhuǎn)移細(xì)胞)D-絲氨酸甲酯鹽酸鹽D-Serine methyl ester hydrochloride 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

人結(jié)細(xì)胞;T84D-蘇氨酸H-D-Thr-OH質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

FOLH1 Others Mouse 小鼠 FOLH1 / GCPII / PSMA / NAALAD1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) D-色氨酸甲酯鹽酸鹽D-Tryptophan methyl ester hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：0.98
即雞包涵體肝炎病毒病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng)AIM2 Others Human 人 AIM2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 山崳酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Behenic acid質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品

小鼠細(xì)胞(分泌促生長激素分泌激素);AtT-20乙基叔丁基(標(biāo)準(zhǔn)品)tert-Butyl ethyl ether質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品

293T/17[HEK 293T/17]細(xì)胞，人胚腎細(xì)胞 人膽管細(xì)胞型細(xì)胞,HCCC-9810細(xì)胞 CL-0160Molt-4(人急性母細(xì)胞細(xì)胞)5×106cells/瓶×2alpha-熊果苷alpha-Arbutin 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR

倉鼠卵巢細(xì)胞;Lec1西多福韋二水合物Cidofovir dihydrate 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)

FGFR4 Others Mouse 小鼠 FGFR4 / CD334 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) NVP-AUY922AUY922質(zhì)量規(guī)格：>98%,HSP90抑制劑
IL17RA Others Rat 大鼠 IL17RA / IL17R 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) DL-HistidineHCLH2ODL-氫錄組酸5克BR，99%

人角膜內(nèi)皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL3-(4-錄本基)務(wù)二醋, 98% 3-(4-Chlorophqnyl)glutcric ccid 3271-74-0

B95-8細(xì)胞，產(chǎn)EBV的絨猴白細(xì)胞 A549(人) 非洲綠猴腎細(xì)胞;BS-C-1D-FructoseD-糖1KU4種混合，10mM/種

EFNA5 Protein Human 重組人 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)L-天門冬酸，英文名或英文縮寫：L-Aspartic acid Mg salt，級別：BR，98%，規(guī)格：100克

HEL(人紅白細(xì)胞細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 肝實質(zhì)細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)143-08-81-壬醇;第九醇;辛基1-Nonanol;Octyl carbinol;Pelargonic alcohol;Nonalol;Alcohol C-9
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。