|
| 產(chǎn)地 | 進(jìn)口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號(hào) | BKP4215 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 | 是 |
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
豬副粘病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng) | Porcine paramyxovirusRTPCR | BKP4215 |
技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：
實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
特點(diǎn)優(yōu)勢：
1. 特異性：豬副粘病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng)使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達(dá)到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測菌的高靈敏檢測，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4. 實(shí)用性：檢測范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個(gè)檢測過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5. 優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
3-(3-Chloropropyl)-1,3-dihydro-7,8-dimethoxy-2H-3-benzazepin-2-one 85175-59-3 中文名： 分子式：C15H18ClNO3 度：98.0% 關(guān)鍵詞： 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
3-(1-Piperazinyl)-1,2-benzisothiazole 87691-87-0 中文名： 分子式：C11H13N3S 度：98.0% 關(guān)鍵詞： 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
2''-O-Acetylsprengerinin C 1220707-33-4 中文名： 分子式：C46H72O17 度：% 關(guān)鍵詞： 麥冬; 螺甾烷; 甾苷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫 小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1(mouse SDF-1) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝
2-n-Propyl-4-methyl-6-(1-methylbenzimidazole-2-yl)benzimidazole 152628-02-9 中文名： 分子式：C19H20N4 度：98.0% 小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1a(mouse SDF-1a) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝
2-Naphthyl N-benzoylphenylalaninate 15873-25-3 中文名：2-萘基N-苯甲?；奖彼狨?/span> 分子式：C26H21NO3 度：98.0% 小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1R(mouse SDF-1R) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝
口蹄疫病毒Asia-1亞型(FMDV-A1)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T Phenformin 834-28-6 中文名：鹽酸苯乙雙胍 分子式：C10H16ClN5
空腸彎曲菌(CJ)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T Trazodone 25332-39-2 中文名：鹽酸曲唑酮 分子式：C19H23Cl2N5O 度：98.0% 關(guān)鍵詞：
可溶性內(nèi)皮細(xì)胞蛋白 C 受體 (sEPCR) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進(jìn)口分裝 3β,5α-Dihydroxyergosta-7,22-dien-6-one 中文名： 分子式：C28H44O3
可溶性內(nèi)皮生長因子受體1 英文名稱： Human Soluble Fms-like Tyrosine Kinase 1/sVEGFR1 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： SFLT1 Paroxetine 78246-49-8 中文名：鹽酸帕羅西汀 分子式：C19H21ClFNO3
可溶性內(nèi)皮生長因子受體1 英文名稱： Human soluble Fms.liketyrosinekinase Receptor 1 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： sFLt-1 Paroxetine 78246-49-8 中文名：鹽酸帕羅西汀 分子式：C19H21ClFNO3 度：99.0%
豬副粘病毒PCR檢測試劑盒供應(yīng)TMEM27 Others Human 人 TMEM27 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 酸性綠 50 質(zhì)量規(guī)格：BS,進(jìn)口原裝Lissamine™ Green B
軟骨細(xì)胞培養(yǎng)基CM酸性綠A質(zhì)量規(guī)格：BS,>97%,進(jìn)口分裝Acid Green A
C-33A細(xì)胞，人子細(xì)胞 兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞,CCC-SMC-1細(xì)胞 人表皮角質(zhì)細(xì)胞-胎兒HEK-f焦1酸鉀(>97%,BC)質(zhì)量規(guī)格：>97%,BCPotassium pyrophosphate, tetrabasic
HFSF(人胚胎眼鞏膜成纖維細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2鎢酸鉀二水(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRPotassium tungstate, dehydrate
hMoCD14+-PB single donorpre-screened Pellet 人類外周血CD14+單核細(xì)胞團(tuán)塊單一來源，預(yù)選型 > 1 mio.cells 人脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞RNAHA-sp miRNA5 μg硫酸奎寧水合物(>98%,BR)質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRQuinine hemisulfate salt hydrate
雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7B5TES；Tris乙磺酸,2-[（三（羥甲基）甲基）氨基]-1-乙磺酸質(zhì)量規(guī)格：>99%,ARTES
中國倉鼠卵巢細(xì)胞系;CHO-TGF-beta-3/2000 Carrying Psv2-beta-TGF 肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞，P815細(xì)胞 INS-1細(xì)胞，大鼠胰島素細(xì)胞3-[ (N-三(羥甲基)甲氨基]-2-羥基丙磺酸鈉質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRTAPSO mono
293來源病毒包裝細(xì)胞;ΦA-GPTAPSO；3-[ (N-三(羥甲基)甲氨基]-2-羥基丙磺酸質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRTAPSO
STIM1 Others Human 人 STIM1 / GOK 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) N-三(羥甲基)甲基-3-氨基丙磺酸鈉質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRTAPS Salt
神經(jīng)元細(xì)胞Many types of cells包裝：5 ×105方(1ml)S-I-G-S-L-A-K質(zhì)量規(guī)格：>95%,BRS-I-G-S-L-A-K
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
