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PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：

方法
1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     
10×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix （2mM）             
4 μl     引物1（10pM）                 
2 μl     引物2（10pM）                 
2 μl     Taq酶 （2U/μl）               
1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  
1 μl      加ddH2O至 50 μl  
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μ進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

技術(shù)服務(wù)內(nèi)容：

實(shí)驗(yàn)步驟包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內(nèi)參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對(duì)表達(dá)量。

特點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：
1. 特異性：札如病毒2型PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對(duì)，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè)，特異性均達(dá)到100%。
 2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證，重現(xiàn)性為100%。
3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè)，當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè)，無需繁瑣的增菌過程。
4.   實(shí)用性：檢測(cè)范圍廣，涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種及腸道致病菌，可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè)，整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。
5.   優(yōu)勢(shì)1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6.   優(yōu)勢(shì)2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證，確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

5-Aminosalicylic acid  89-57-6  中文名：5-氨基水楊酸  分子式：C7H7NO3    CLIAKitforATA(HumanAngiotensinaseA)ELISAKit人緊張肽酶A規(guī)格：48T/96T

Norfloxacin  70458-96-7  中文名：諾氟沙星  分子式：C16H18FN3O3    線粒體復(fù)合物V蛋白共沉淀分析試劑盒5次

Indapamide  26807-65-8  中文名：吲達(dá)帕胺  分子式：C16H16ClN3O3S    Rabbitadramycin,ADRELISAKit兔阿霉素(ADR)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Loperamide   34552-83-5  中文名：鹽酸洛哌丁胺  分子式：C29H34Cl2N2O2    豚鼠Ⅱ型肺泡細(xì)胞表面抗原(KL-6)ELISA試劑盒 ，英文名： KL-6 ELISA Kit

Nefopam   23327-57-3  中文名：鹽酸奈福泮  分子式：C17H20ClNO    Human pulmonary surfacta associated protein A (SP-A) ELISA Kit 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA試劑盒
土壤酸性0酸酶（S-ACP）試劑盒   可見分光光度法   50管/48樣  4-Aminoantipyrine  1983/7/8  中文名：4-氨基安替比林  分子式：C11H13N3O 

土壤漆酶測(cè)試盒   可見分光光度法   50管/48樣              4-Amino-2,5-dimethoxy-N-phenylbenzenesulphonamide  中文名：4-氨基-2,5-二甲氧基-N-苯基苯磺酰胺  分子式：C14H16N2O4S 

土壤脲酶（UE)測(cè)試盒   可見分光光度法   50管/24樣  4-Amino-3,5-dichloropyridine  中文名：  分子式：C5H4Cl2N2  度：98.0%

土壤酶（S-CAT）測(cè)試盒   紫外分光光度法   50管/24樣  4-Amino-3-hydroxybenzoic acid  2374-03-0  中文名：4-氨基-3-羥基苯甲酸  分子式：C7H7NO3 

土壤堿性蛋白酶   可見分光光度法   50管/24樣  4-Amino-3,5-dichloropyridine  22889-78-7  中文名：  分子式：C5H4Cl2N2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：
札如病毒2型PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格P3X63Ag8.653小鼠細(xì)胞 Mouse myeloma cell line P3X63Ag8.653 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS多奈哌齊質(zhì)量規(guī)格：>98%Donepezil

IL12A & IL12B Protein Human 重組人 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白多尼培南(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：>99%,標(biāo)準(zhǔn)品,一水合物Doripenem

USMC(大鼠平滑肌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 HAVSMC, 人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞米爾貝1質(zhì)量規(guī)格：A3+A4>97%Milbemycin oxime

CM-R089大鼠皮膚肥大細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL伐地考昔質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRValdecoxib

CD14 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD14 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 胃膜素,胃粘蛋白,人胃泌素質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRGastrin I,human
中國倉鼠肺細(xì)胞;V79異蓮心堿（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Isoliensinine

GHR Others Mouse 小鼠 GHR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 蓮心堿高氯酸鹽（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Liensinine Perchlorate

細(xì)胞凍存液CFM丁1基苯酞（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品川芎提取,液體3-Butylidenephthalide

FLT3 Others Mouse 小鼠 FLT-3 / CD135 / FLK-2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 茯苓酸（標(biāo)準(zhǔn)品）質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Pachymic acid

人胃腺癌細(xì)胞;BGC-823大黃素(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標(biāo)準(zhǔn)品Emodin
反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。